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    详细介绍1971-1972年河北省石家庄地区财贸学校物价专业学习1972-1976年河北省石家庄地区商业局办公室干事、副主任1976-1983年河北省石家庄地委办公室资料科干事、科长(其间:1980-1983年河北师范大学夜大学政教系学习)1983-1985年河北省无极县委书记1985-1986年河北省石家庄地委副书记、行署专员1986-1990年共青团河北省委书记(其间:-中央党校党建理论培训班学习)1990-1993年河北省承德地委副书记、行署专员1993-1997年河北省委常委、秘书长(1992-1994年中央党校函授学院经济专业学习)1997-1998年河北省委常委、农村工作领导小组副组长1998-2000年陕西省委常委,农村工作领导小组副组长、办公室主任(1996-1998年中国社会科学院研究生院财贸系商业经济专业在职研究生课程班学习)2000-2002年陕西省委常委、组织部部长2002-2002年陕西省委常委,西安市委书记、市人大常委会主任2002-2003年陕西省委副书记,西安市委书记、市人大常委会主任2003-2004年黑龙江省委副书记2004-2007年黑龙江省委副书记、副省长(其间:2005-2007年哈尔滨工业大学高级管理人员工商管理专业学习,获高级工商管理硕士学位)2007-2008年黑龙江省委副书记、代省长2008-2010年黑龙江省委副书记、省长2010-2012年贵州省委书记、省人大常委会主任2012-2012年中央办公厅主持常务工作的副主任(正部长级),中央办公厅主任,中央直属机关工委书记,贵州省人大常委会主任2012-2014年中央政治局委员、中央书记处书记,中央办公厅主任,中央直属机关工委书记2014-2017年中央政治局委员、中央书记处书记,中央办公厅主任,中央国家安全委员会办公室主任,中央直属机关工委书记2017-2018年中央政治局常委,中央国家安全委员会办公室主任2018-中央政治局常委,十三届全国人大常委会委员长  T

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    首页 >>> 技术文章 >>> 半抗原偶联试剂盒实验条件的选择很重要,包括什么

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    发布时间:2023-03-29   点击次数:622次
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      在半抗原偶联试剂盒实验中,进行各项实验条件的选择是很重要的,其中包括:
     
      1.固相载体的选择:许多物质可作为固相载体,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体,在使用前均可进行筛选:用等量抗原包被,在同一实验条件下进行反应,观察其显色反应是否均一性,据此判明其吸附性能是否良好。
     
      2.包被抗体(或抗原)的选择:将抗体(或抗原)吸附在固相载体表面时,要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0~9.6之间。吸附温度,时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃18~24小时。蛋白质包被的适浓度需进行滴定:即用不同的蛋白质浓度(0.1、1.0和10μg/ml等)进行包被后,在其它试验条件相同时,观察阳性标本的OD值。选择OD值大而蛋白量少的浓度。对于多数蛋白质来说通常为1~10μg/ml。
     
      3.酶标记抗体工作浓度的选择:首先用直接ELISA法进行初步效价的滴定(见酶标记抗体部份)。然后再固定其它条件或采取"方阵法"(包被物、待检样品的参考品及酶标记抗体分别为不同的稀释度)在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度。
     
      4.酶的底物及供氢体的选择:对供氢体的选择要求是价廉、安全、有明显地显色反应,而本身无色。有些供氢体(如OPD等)有潜在的致癌作用,应注意防护。有条件者应使用不致癌、灵敏度高的供氢体,如TMB和ABTS是较为满意的供氢体。底物作用一段时间后,应加入强酸或强碱以终止反应。通常底物作用时间,以10-30分钟为宜。底物使用液必须新鲜配制,尤其是H2O2在临用前加入。

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